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香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——結果和討論

來源:上海謂載 瀏覽 1908 次 發布時間:2021-11-01


三、結果與討論


3.1. 壓縮等溫線


純和混合單層的 pA 等溫線與分子面積的關系如圖 1 所示。CMR/DPPG 等溫線顯示出與純 DPPG 脂質相似的趨勢(圖 1a)。 相似相 對所有 CMR/DPPG 混合物都觀察到了轉變。 DPPG 和 DPPC 顯示崩潰壓力 (DPcoll) 為 52 mN.m-1 次方和 60 mN.m-1次方 , 分別。 一個過渡 (p ffi 3 mN.m-1次方 ) 從液體 發現純 DPPE 單層膨脹為凝聚相 與 D. coll 在 ffi55 mN.m-1次方 . 為 D. coll 獲得的值 純脂質與文獻一致(Vollhardt 等人, 2000; 諾沃塔斯卡等人,2014 年)。

圖 1 混合單層 CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE (b) 和 (c) 的 pA 等溫線 不同濃度的 CMR/DPPC。


DPcoll 強烈依賴于混合的組成 單層并與 CMR 摩爾比成比例地減少。 從圖 1a 和 b 中提供的數據可以看出,在 由于加入了 CMR,xCMR = 0.87(DPPG)和 0.75(DPPE) 在這些單層上形成更有組織的狀態(Takao 等人,1995 年)。


考慮到自研究脂質以來極性區域的差異,評估等溫線的界面行為 具有相同的疏水部分。 DPPE 和 DPPC 是兩性離子脂質(圖 2)。 DPPG由陰離子極性頭組成 (圖2)。 極性基團影響兩者之間的混溶性 研究的分子導致不同的分子排列 (Bouffioux 等人,2007 年)和脂質包裝(Hazell 等人,2016 年)。 作為 正如預期的那樣,DPPG 和 DPPC 混合膜導致膨脹的單層(圖 1a 和 c)。 潘等人。 (2012) 證明 DPPG 頭部基團區域比磷脂酰膽堿對應物大 由于相互排斥的靜電相互作用 帶電 PG 頭組。 DPPC 疏水部分保持更遠的距離,最大限度地減少橫向內聚相互作用(Myers, 1999)。 相反,DPPE 混合膜會產生固相單層(圖 1b)。

圖 2. 磷脂和香豆素分子結構。 DPPC 和 DPPC 具有圓柱形分子形狀,而 DPPE 具有錐形幾何形狀。


3.2. 表面電位測量


作為函數分子面積 (ΔVA) 的表面電位為 如圖3a所示。 為所有研究的磷脂獲得的 ?V 值 與之前的報告相似(Andrade et al., 2006; Nowotarska 等,2014)。 ?V(460 mV 至 275 mV)逐漸降低 對于 DPPG,觀察到 CMR 摩爾分數的函數。 ?V 易受極性和非極性基團的取向影響。


DPPE 和 DPPC 的 ?V 作為函數的線性相關性 CMR 濃度的變化分別在圖 3b 和 c 中觀察到。 一種 對于高 CMR 濃度,ΔV 降低。 此外,DPPE [DPPC] 浮動單層導致 ?V ~ 604 [605] mV 對于 XCMR = 0.87 約為 334 [351] mV。 表面電位的降低可以通過 CMR 和兩性離子脂質分子之間發生的氫鍵來解釋,即 CMR 之間 (C=O) 作為氫受體基團和質子化脂質 頭部基團(例如在 DPPE 分子中發現的 NH3+)(Boggs, 1987)。 DPPG 具有形成氫鍵的能力 鄰近磷脂酰甘油脂質的甘油部分和磷酸氧(Zaraiskaya 和 Jeffrey,2005)。 DPPE 可以 形成分子間和分子內氫鍵。 強烈的分子間相互作用導致液晶相變溫度升高,影響穩定性 和膜滲透性(Leekumjorn 和 Sum,2006 年)。 這 DPPE 的胺基(氫供體)可以強烈相互作用 與磷酸鹽/羰基或水(氫受體)。 此外,膽堿顯示出疏水性水合作用 在 CH3 基團周圍,對于胺發生競爭 與頭基中的水和氧原子形成氫鍵 (Leekumjorn 和 Sum,2006 年)。

圖 3 CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE (b) 和 CMR/DPPC (c) 的 DV-A 濃度。


圖 4. p = 20mN/m 時純磷脂單層的表觀偶極矩。


CMR 與單層尾部相互作用,因為它具有親脂性 辛醇-水分配系數(log Pow)為 = 2.54(拉布蒂,2012 年)。 分子與磷脂尾部的結合 導致表觀偶極矩的變化(Hidalgo 等人, 2004)。 視在偶極矩由以下定義 公式:


其中 ?V 是表面電位,l 是表觀偶極矩, A 是每個分子的面積,e0 是真空介電常數,W 是 雙層貢獻。 雙層貢獻是 根據安德拉德等人計算。 (2005)。


從方程獲得的數據。 1 我們可以觀察到 混合視在垂直偶極矩的關系 (l) 對純磷脂單層的垂直矩 (l0) 根據單層壓縮變化 (Geraldo 等人,2013 年)(圖 4)。 考慮到 p = 20mN/m 處的分子面積(最高 DPcoll 為 純 CMR 膠片)。 本征分子偶極子的取向 (l) 形成薄膜的分子和亞相中水分子的組織結構已知起著根本作用。 值得注意的是,l 被認為是偶極子的矢量和 由水合極性基團和烴類產生的矩 鏈(l = lpolar + lhydrocarbon 鏈)。 此外,DPPG、DPPC 和 DPPE 具有類似的疏水尾。 因此,有理由 假設非極性基團對整體 ?V 的貢獻為 相同。 ΔVA 曲線輪廓的差異是由于它們的 不同的 lpolar 貢獻。


3.3. 熱力學分析


熱力學分析是基于平均值進行的 分子面積 (mma)、過剩面積 (DAE)、過剩吉布斯自由能 (?Ge) 和過量的吉布斯混合自由能 (?Gmix) 在 p = 5, 10, 15 和 20 mN/m。 mma 的線性偏差表明組分根據可加性規則的混溶性 (Szczes 等人,2012 年)(圖 3)。 DAE 可以計算為

其中 A1,2 是 mma,Aid 是理想的混合單層,X1 和 X2 分別是組分 1 和 2 的摩爾分數。 A1 和 A2 是相同表面壓力下每分子純單分子層的相應面積。 DAE 值變為零 當物質形成理想混合物或不混溶時 (瓊斯和查普曼,1996 年)。


分子面積作為 CMR/ DPPG如圖5a所示。 可以看出負偏差 mma (XCMR = 0.33–0.67) 由于分子吸引力相互作用的增加。 CMR/DPPG 薄膜被認為是部分混溶和非理想的浮動單層,因為線性度不高 觀察到的。 CMR/DPPE 混合薄膜的結果在 XCMR=0.25 和 0.67 時表現出不同的斷裂點(圖 5b)。 DAE 節目 包裝效率甚至幾何形狀的改進 調節發生在較低的 XCMR(圖 6)(Andrade 等人, 2006; 周和張,2000)。

圖 5. 每個分子的平均面積與香豆素中香豆素摩爾分數的函數關系 固定表面壓力下的混合單層:CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE (b) 和 不同濃度下的 CMR/DPPC (c)(實線:實際平均分子面積; 虛線:理想的平均分子面積)。

圖 6 CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE 混合單層分子面積過大 (b) 和不同濃度的 CMR/DPPC (c)。


觀察到 CMR/DPPC 與 DAE 的正偏差 由于更不混溶的行為而導致的混合膜(圖 5c 和 6c)。 偏差程度取決于表面 壓力,因為在更高的壓力下,分子變得更多 包裝中分子間相互作用的影響變得不那么明顯(Chou 和 Chang,2000)。 令人厭惡的 行為表明相分離有利于分子聚集(Mishra 等,2012)。 得到了類似的結果 其他香豆素(Sarpietro 等人,2011 年;Chakraborty 等人,2012 年)。


為了分析熱力學特性,我們計算了 ΔGe 和 ΔGmix(Baldyga 和 Dluhy,1998;DynarowiczLatka 等,2001;Maget-Dana,1999)如下:




其中 DGid 是混合吉布斯自由能的理想變化 由

其中 K 代表玻爾茲曼常數,T 是絕對值 溫度。 ?Ge 代表過量的吉布斯自由能或分子間相互作用的貢獻 混合物。 如果 ?Ge 為負值,則組分之間現有的分子相互作用為吸引型,而為正值 變異意味著一種排斥行為。 ?Ge 由以下公式定義:

CMR/DPPG 混合膜的 ?Ge 和 ?Gmix 表示負 從 XCMR ≥ 0.25 到 XCMR = 1.0 的偏差(圖 7a 和 8a)。 ?Ge 和 ?Gmix 負值表明 CMR/DPPE 單層是 熱力學穩定(圖 7b)。 ?Ge 和 ?Gmix 值為 DPPC 混合單層陽性,表明不混溶 (圖 7c 和 8c)。 分子之間的距離取決于 在導致排斥的磷脂頭部基團上 互動(邁爾斯,1999 年;博格斯,1987 年)。

圖 7 CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE (b) 和 CMR/DPPC (c) 在不同條件下的 DGe 濃度。

圖 8 CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE (b) 和 CMR/DPPC (c) 的 DGmix 濃度。


3.4. 原子力顯微鏡分析


圖 9 顯示了純磷脂單層的 AFM 圖像 在 p = 20 mN/m 時轉移。 純磷脂顯示出均勻的 均方根 (rms) 等于 0.219 nm 的圖案, DPPG、DPPE 和 DPPC 分別為 0.060 nm 和 0.054 nm (圖 9)。 我們獲得了 rms ~ 0.045 nm (XCMR = 0.87) 相當于 光滑的單層形貌(圖 10a)。 另一方面, CMR/DPPE 和 CMR/DPPC 薄膜對應于粗糙表面 rms 分別為 0.1754 nm 和 0.072 nm(圖 10b 和 c)。 測量重復三次,rms 的標準偏差約為 5%。




圖 9. 純 DPPG (a)、DPPE (b) 和 DPPC 的地形圖像。

圖 10. 混合單層的地形圖像:CMR/DPPG (a)、CMR/DPPE (b) 和 CMR/DPPC (c)。 香豆素的摩爾分數相當于0.87。



香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——摘要、簡介

香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——材料和方法

香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——結果和討論

香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——結論、致謝!

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